1. Chuẩn bị nguyên liệu:
Khoai tây: 200 gr.
Đường Dextrose: 20 gr.
Thạch Agar: 20 gr.
Nước: 1 l.ít
Bông không thấm nước
Ghi chú:
- Nếu không có đường Dextrose thì mua đường mía, sacharose thay thễ cũng được.
- Thạch và bông mua ở siêu thị chú ý loại Agar nguyên chất.
- Khoai tây chọn loại không bị thối, ...
2. Khoai tây rửa sạch và cắt thành hình khối một cm;
3. chọn và rửa sạch chai lọ để dùng (có thể dùng chai whiskey hoặc chai coca, sữa đậu nành - thủy tinh trắng).
4. Cho khoai vào nồi, thêm nước vừa đủ một lít, đun sôi khoảng 15 đến 20 phút;
5. Gạn lấy dịch trong (nước chiết khoai tây), thêm nước đến 1 lít
6. Mang vào bếp. thêm đường, Agar - khuấy đều tay và đun nhỏ lửa cho tan hết agar
7. Chia vào các chai, mỗi chai 5 - 10 mm môi trường.
8. Đậy bằng bông không thấm nước.
9. Khử trùng ở121oC trong 20 - 30 phút. Để đồng hồ áp suất trở về 0 mới mở ốc nồi, lấy môi trường ra
10. Đặt nghiêng (như hình) các chai để môi trường lan đều sao cho môi trường không chạm vào nút bông. Khi môi trường trong chai đã đông hẳn, cất vào nơi khô ráo, sạch sẽ để dùng dần.
11. Để một vài bình ra ngoài môi trường để kiểm tra. Nêu sau một thời gian thấy các nốt, hoặc đốm trên bề mặt thạch là môi trường chưa hoan toàn được tiệt trùng
12. Hơ miệng chai một lần nữa và đậy nút bông lại- vẫn để gần ngọn lửa
Chú ý: Đáy chai luôn để thấp hơn miệng chai và gần ngọn lửa trong suốt quá trình thao tác.
13. Dán nhãn: Ngày tháng, tên loại nấm
Cấy chuyển từ môi trường PDA sang PDA
Khi cấy vào môi trường PDA, hệ sợi phát triển khoảng 15 ngày . (Tùy thuộc vào loài).
9. Dùng dao cát một mẩu nhỏ (5 mm x 5 mm) hệ sợi nấm trên môi trường thạch PDA .
10. Hơ miệng bình, tháo nút bông (giống hình).
11. Đưa miếng thạch có chúa hệ sợi nấm vào giữa bề mặt thạch trong chai
12. Đậy nút bông ở gần ngọn lửa.
13. Dán nhãn, ghi đầy đủ thông tin như trên
14. Thời gian nuôi cấy khoảng 10 - 15 ngày, tùy loại
15. Để các chai có sợi nấm phát triển nơi khô ráo, sạch sẽ. Kiểm tra sự phát triển hàng ngày
16. Khi sợi nấm lan kín môi trường, lưu giũ trong ngăn mát tủ lạnh
17. Kiểm tra các chai đối chứng để xác định nguyên nhân gây nhiễm, phòng các tác nhân này ở những lầ sau.
18. Ghi chép lại đầy đủ các thông tin quan sát được
Khoai tây: 200 gr.
Đường Dextrose: 20 gr.
Thạch Agar: 20 gr.
Nước: 1 l.ít
Bông không thấm nước
Ghi chú:
- Nếu không có đường Dextrose thì mua đường mía, sacharose thay thễ cũng được.
- Thạch và bông mua ở siêu thị chú ý loại Agar nguyên chất.
- Khoai tây chọn loại không bị thối, ...
2. Khoai tây rửa sạch và cắt thành hình khối một cm;
3. chọn và rửa sạch chai lọ để dùng (có thể dùng chai whiskey hoặc chai coca, sữa đậu nành - thủy tinh trắng).
4. Cho khoai vào nồi, thêm nước vừa đủ một lít, đun sôi khoảng 15 đến 20 phút;
5. Gạn lấy dịch trong (nước chiết khoai tây), thêm nước đến 1 lít
6. Mang vào bếp. thêm đường, Agar - khuấy đều tay và đun nhỏ lửa cho tan hết agar
7. Chia vào các chai, mỗi chai 5 - 10 mm môi trường.
8. Đậy bằng bông không thấm nước.
9. Khử trùng ở121oC trong 20 - 30 phút. Để đồng hồ áp suất trở về 0 mới mở ốc nồi, lấy môi trường ra
10. Đặt nghiêng (như hình) các chai để môi trường lan đều sao cho môi trường không chạm vào nút bông. Khi môi trường trong chai đã đông hẳn, cất vào nơi khô ráo, sạch sẽ để dùng dần.
11. Để một vài bình ra ngoài môi trường để kiểm tra. Nêu sau một thời gian thấy các nốt, hoặc đốm trên bề mặt thạch là môi trường chưa hoan toàn được tiệt trùng
12. Hơ miệng chai một lần nữa và đậy nút bông lại- vẫn để gần ngọn lửa
Chú ý: Đáy chai luôn để thấp hơn miệng chai và gần ngọn lửa trong suốt quá trình thao tác.
13. Dán nhãn: Ngày tháng, tên loại nấm
Cấy chuyển từ môi trường PDA sang PDA
Khi cấy vào môi trường PDA, hệ sợi phát triển khoảng 15 ngày . (Tùy thuộc vào loài).
9. Dùng dao cát một mẩu nhỏ (5 mm x 5 mm) hệ sợi nấm trên môi trường thạch PDA .
10. Hơ miệng bình, tháo nút bông (giống hình).
11. Đưa miếng thạch có chúa hệ sợi nấm vào giữa bề mặt thạch trong chai
12. Đậy nút bông ở gần ngọn lửa.
13. Dán nhãn, ghi đầy đủ thông tin như trên
14. Thời gian nuôi cấy khoảng 10 - 15 ngày, tùy loại
15. Để các chai có sợi nấm phát triển nơi khô ráo, sạch sẽ. Kiểm tra sự phát triển hàng ngày
16. Khi sợi nấm lan kín môi trường, lưu giũ trong ngăn mát tủ lạnh
17. Kiểm tra các chai đối chứng để xác định nguyên nhân gây nhiễm, phòng các tác nhân này ở những lầ sau.
18. Ghi chép lại đầy đủ các thông tin quan sát được
